人類感染Ｂ型肝炎病毒之後，如果沒有產生抗體而不幸變成帶原者之後，病毒會一直存在肝臟內，雖然病毒不會直接對肝臟造成傷害，但卻會激發人體內的免疫細胞去辨識肝細胞內之病毒進而攻擊肝細胞引發肝炎，使肝功能受到影響。如果肝臟反覆嚴重發炎而不治療，就有可能演變成肝硬化，因此慢性Ｂ型肝炎患者在急性發作時，應該接受治療以避免走上肝硬化、肝癌的不歸路。針對Ｂ型肝炎病毒的特性，目前醫界對於慢性Ｂ型肝炎的治療最多採用的方式是藥物治療，可持續抑制B型肝炎病毒複製，並提高e抗原陰轉的比例。

分析方法

Nucleic Acid Extraction，MagCore® HF16，MagCore；PCR，Sequence Specific Primers；DNA Sequencing (DNA定序分析)
 

主要原理為 PCR 反應：

1. 將 HBV DNA 上 Reverse transcriptase gene 當作目標以 PCR 擴增放大後，以 Sequence specific primer 對擴增的 PCR 產物進行定序，將定序結果轉譯成胺基酸序列進行比對。
2. 當 HBV DNA 濃度較低時，PCR 後可能無法在凝膠電泳上看到結果，可以針對此 PCR 產物作 Semi-Nest PCR 再次放大;Semi-Nest PCR 是使用第一次 PCR 的 Forward primer，配合一往內寫的 Reverse primer， 即可放大出特異片段。

參考區間

Normal HBV DNA，Wild Type表示未檢測出可偵測之突變點。

臨床意義  

主要偵測B型肝炎病毒4種口服抗病毒藥物之抗藥性，包括Lamivudine(LMV)肝安能、Adefovir (ADV) mutant肝適能、Entecavir (ETV) mutant貝樂克 & Sebivo (LdT) mutant Telbivudine喜必福。

1.Lamivudine(肝安能): 為一核苷類似物(nucleoside analogue)為治療慢性B型肝炎的抗病毒藥物。最近的研究發現超過一年的肝安能延長治療(additional treatment)，對大多數病患可以持續抑制B型肝炎病毒的複製，維持血清轉氨酶(ALT)值正常，並且可以提高e抗原陰轉的比例。然而長期的肝安能治療會增加病毒的抗藥性，連續服用肝安能一年，約15-20%患者產生抗藥性，連續服用2年增至40%，連續3年則高達66%，最常見的抗藥基因突變發生在B型肝炎病毒聚合酶中YMDD的區域，在第552個氨基酸methionine會被valine 或isoleucine 所取代；產生具抗藥性的YVDD或YIDD。

2. Adefovir dipivoxil(肝適能): 會直接和B型肝炎病毒的DNA聚合酶結合，進而抑制B型肝炎病毒的複製，在一般的治療劑量下，它對人類細胞的DNA聚合酶並沒有影響。因此可達到選擇性抑制病毒複製的效果。肝適能在用藥一段時間後，有些病毒會在DNA上發生基因變異而產生抗藥性，使第188個氨基酸Alanine被Valine或Threonine所取代；第236個氨基酸Asparagine (Asn)轉變成為Threonine(Thr)。

3. Entecavir(貝樂克): 與肝適能相同，可以抑制已對肝安能產生抗藥性的B肝病毒，由於需要多位點的氨基酸突變才會產生抗藥性，所以連續服藥5年的抗藥性比率約為1.2％，但已對肝安能產生抗藥性的患者，改用貝樂克後再度產生抗藥性的機會還是略高。

4.Sebivo(喜必福): 為新型的口服抗病毒藥物，產生抗藥性的比例比肝安能稍低，但若是對肝安能或貝樂克已經產生抗藥性，便不建議使用喜必福。

報告說明

1. Target gene: Reverse transcriptase gene

2. Limit of Detection: 148 IU/mL

3. Report Form:

參考資料：

大安聯合醫事檢驗所：Hepatitis B Virus Drug Resistance Examination，HBV-YMDD  B型肝炎病毒抗藥性基因檢測

衛生福利部疾病管制署:長期追蹤研究抗藥性B 型肝炎病毒的診斷與治療

財團法人肝病防治學術基金會 - 最新B肝治療資詢：https://goo.gl/nWkyUJ